RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA – PIGMENTOS HIDROSSOLÚVEIS E LIPOSSOLÚVEIS EM TECIDOS VEGETAIS

INTRODUÇÃO

Além das clorofilas e dos carotenóides que são pigmentos lipossolúveis, as plantas contém outros pigmentos como os flavonóides, que constituem uma série de compostos relacionados, solúveis em água, tendo com estrutura básica um esqueleto C₁₅ de flavona. Os flavonóides ocorrem universalmente nas plantas superiores, mas são incomuns entre as criptógamas. Encontram-se dissolvidos em água, no suco celular (no interior do vacúolo) tanto de folhas como de fruto e de raízes, mas se acumulam especialmente nas flores, conferindo-lhes as cores características. Desses pigmentos, os mais conhecidos são as antocianinas, cada qual com uma cor distinta, que varia conforme o pH, do azul ao vermelho, embora algumas sejam incolores. Além de sua importância como atrativo para insetos polinizadores, parecem ter a função de inibidores de bactérias e têm sido utilizadas como marcadores por taxonomistas, na classificação de plantas.

As antocianinas ocorrem na forma de glicosídeos, ligados comumente a uma ou duas unidades de glicose ou de galactose. A parte molecular sem o açúcar ainda mantém a coloração e é denominada antocianidina. O acúmulo de antocianinas em caules, folhas ou frutos é estimulado por altos níveis de luz, por deficiência de certos nutrientes (nitrogênio, fósforo, enxofre e outros) e por temperaturas baixas.

OBJETIVOS

Observar a separação de pigmentos lipossolúveis e hidrossolúveis, por meio de sua partição em solventes não miscíveis. Acompanhar as variações das propriedades de alguns destes pigmentos, em função das variações do pH do meio ou de sua hidrólise parcial.

MATERIAIS

Folhas verdes e variegadas de qualquer espécie ou de Tradescantia sp;     Almofariz (gral); Tubos de ensaio; Acetona;   Proveta de 100 mL;  Béquer de 100 mL; Algodão; Funil de vidro;  Papel de filtro; Funil separador; Pipetas ou seringas de 5 ou 10 mL;  NaOH 0,1 N;  HCl 0,1 N;  KOH 3 N.

MÉTODOS

1-      Macere 10 a 15 folhas variegadas e verdes em 40 mL de acetona;

2-      Filtre o homogenado em um disco de papel filtro;

3-      Tome 20 mL do filtrado num funil separador e adicione inicialmente 20 mL de éter etílico e depois 20 mL de água destilada, girando sempre o funil; observe o que acontece;

4-      Transfira 5 mL da camada inferior para um tubo de ensaio e acrescente 5 mL de água destilada;

5-       Faça o mesmo com a camada superior, observando as diferenças.

6-      Acrescente à mistura proveniente da camada inferior algumas gotas de NaOH    0,1 N e anote o resultado. Em seguida adicione a mesma quantidade de HCl 0,1 N e observe o que acontece.

7-      À mistura proveniente da camada superior acrescente algumas gotas de KOH 3N e observe o que ocorre.

8-      Explique os resultados obtidos.

RESULTADOS E DISCUSSÃO

 

  

Pode-se observar:

·         Quando o éter etílico foi adicionado à solução se separou em duas fases uma verde (devido à presença de clorofila) e uma rosa (devido à presença de xantofila que é um tipo de carotenoide); sendo que a parte com presença de clorofila é maior.

·         Quando foi acrescentada a água destilada a parte rosa ficou maior, sendo que depois passou para um tom meio arroxeado.

·         Em pH básico a antocianina ficou num tom de verde; comprovando assim  que realmente houve a mudança de pH.

·         Quando se acrescentou a solução ácida à mistura voltou para a tonalidade rosa.

CONCLUSÃO

 No experimente os pigmentos são divididos em lipossolúveis e hidrossolúveis. sendo que  a xantofila é  a hidrossolúvel   por apresentar alterações na tonalidade quando em contato com diferentes  níveis de pH. A clorofila por não apresentar mudanças de tonalidade independente do pH é considerada lipossolúvel.

QUESTÕES

1-      Represente esquematicamente a partição dos pigmentos lipo e hidrossolúveis nas fases da mistura de solventes.

2-      Onde se localizam nas células, os pigmentos lipossolúveis das plantas verdes? Quais são estes pigmentos?

Os pigmentos são localizados nos cloroplastos, sendo eles clorofilas e carotenóides.

3-      Quais são os pigmentos hidrossolúveis e em que partes da célula eles se encontram?

Os pigmentos hidrossolúveis são os flavonoides que são localizados no interior do vacúolo das células. Entre esse pigmentos se destaca a antocianina.

4-      Faça o esquema de uma célula vegetal, indicando os seus principais constituintes.

 Fonte: https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgC4ALe17kDMMR32dTw9z_54pjWBHi-Dq1mXV-WqgFc6pJjHHN4N2Q03zNIDRQbpTcENPYZNx6CpBLFxzJF7WX-kM9t64eA5Ue0BDY2U8kibp2XDKxQEsdVKCUbH8bYn1bzkh2MdnBXcD3X/s400/5.png

5-      Por que podemos afirmar, com certeza, que as antocianinas não participam da fotossíntese?

Porque as antocianinas são pigmentos acessórios somente absorvem luz, mas em comprimentos de onda diferentes daqueles absorvidos pelas clorofilas (pigmento fotossintetizante) e, portanto, são apenas receptores suplementares de luz.

6- Por que certos frutos ficam mais vermelhos quando expostos à luz solar?

Pois em seu interior estão presentes flavonóide que são pigmentos fotossintéticos, que ficam em estado de excitação quando expostos na luz solar, deixando-os com um aspecto mais avermelhado.

7- Se você fizesse um extrato de pétalas de uma flor vermelha, que tipo de pigmento seria encontrado ao fazer sua separação por partição em solventes? O que aconteceria se você alterasse o pH da solução?

 Seriam encontrados flavonoides, como por exemplo, as antocianinas. Quando há alteração no pH  ocorre a mudança da coloração  do extrato.

                                                          

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

Roteiro adaptado de:

MAESTRI  et al.  Fisiologia Vegetal (exercícios práticos), Viçosa. Editora UFV, 1998.

FREITAS, H.M.B. Manual de Atividades Práticas de Fisiologia Vegetal, Salvador: Edufba, 2006.