INTRODUÇÃO
Além das clorofilas e dos carotenóides que são pigmentos lipossolúveis,
as plantas contém outros pigmentos como os flavonóides, que constituem uma
série de compostos relacionados, solúveis em água, tendo com estrutura básica
um esqueleto C15 de flavona. Os flavonóides ocorrem universalmente
nas plantas superiores, mas são incomuns entre as criptógamas. Encontram-se
dissolvidos em água, no suco celular (no interior do vacúolo) tanto de folhas
como de fruto e de raízes, mas se acumulam especialmente nas flores,
conferindo-lhes as cores características. Desses pigmentos, os mais conhecidos
são as antocianinas, cada qual com uma cor distinta, que varia conforme o pH,
do azul ao vermelho, embora algumas sejam incolores. Além de sua importância
como atrativo para insetos polinizadores, parecem ter a função de inibidores de
bactérias e têm sido utilizadas como marcadores por taxonomistas, na classificação
de plantas.
As antocianinas ocorrem na forma de glicosídeos, ligados comumente a uma
ou duas unidades de glicose ou de galactose. A parte molecular sem o açúcar
ainda mantém a coloração e é denominada antocianidina. O acúmulo de
antocianinas em caules, folhas ou frutos é estimulado por altos níveis de luz,
por deficiência de certos nutrientes (nitrogênio, fósforo, enxofre e outros) e
por temperaturas baixas.
OBJETIVOS
Observar a separação de pigmentos lipossolúveis e hidrossolúveis, por
meio de sua partição em solventes não miscíveis. Acompanhar as variações das
propriedades de alguns destes pigmentos, em função das variações do pH do meio
ou de sua hidrólise parcial.
MATERIAIS
Folhas verdes e
variegadas de qualquer espécie ou de Tradescantia
sp; Almofariz (gral); Tubos de
ensaio; Acetona; Proveta de 100
mL; Béquer de 100 mL; Algodão; Funil de
vidro; Papel de filtro; Funil separador;
Pipetas ou seringas de 5 ou 10 mL; NaOH
0,1 N; HCl 0,1 N; KOH 3 N.
MÉTODOS
1-
Macere 10
a 15 folhas variegadas e verdes em 40 mL de acetona;
2-
Filtre o homogenado em um disco de papel filtro;
3-
Tome 20 mL do filtrado num funil separador e adicione
inicialmente 20 mL de éter etílico e depois 20 mL de água destilada, girando
sempre o funil; observe o que acontece;
4-
Transfira 5 mL da camada inferior para um tubo de
ensaio e acrescente 5 mL de água destilada;
5-
Faça o mesmo com
a camada superior, observando as diferenças.
6-
Acrescente à mistura proveniente da camada inferior
algumas gotas de NaOH 0,1 N e anote o
resultado. Em seguida adicione a mesma quantidade de HCl 0,1 N e observe o que
acontece.
7-
À mistura proveniente da camada superior acrescente
algumas gotas de KOH 3N e observe o que ocorre.
8-
Explique os resultados obtidos.
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Pode-se observar:
·
Quando
o éter etílico foi adicionado à solução se separou em duas fases uma verde (devido
à presença de clorofila) e uma rosa (devido à presença de xantofila que é um
tipo de carotenoide); sendo que a parte com presença de clorofila é maior.
·
Quando
foi acrescentada a água destilada a parte rosa ficou maior, sendo que depois
passou para um tom meio arroxeado.
·
Em
pH básico a antocianina ficou num tom de verde; comprovando assim que realmente houve a mudança de pH.
·
Quando
se acrescentou a solução ácida à mistura voltou para a tonalidade rosa.
CONCLUSÃO
No experimente os pigmentos são divididos em
lipossolúveis e hidrossolúveis. sendo que
a xantofila é a
hidrossolúvel por apresentar alterações
na tonalidade quando em contato com diferentes
níveis de pH. A clorofila por não apresentar mudanças de tonalidade
independente do pH é considerada lipossolúvel.
QUESTÕES
1- Represente esquematicamente a partição
dos pigmentos lipo e hidrossolúveis nas fases da mistura de solventes.
2-
Onde se localizam nas células, os pigmentos
lipossolúveis das plantas verdes? Quais são estes pigmentos?
Os pigmentos são
localizados nos cloroplastos, sendo eles clorofilas e carotenóides.
3-
Quais são os pigmentos hidrossolúveis e em que partes
da célula eles se encontram?
Os pigmentos
hidrossolúveis são os flavonoides que são localizados no interior do vacúolo
das células. Entre esse pigmentos se destaca a antocianina.
4- Faça o esquema de uma célula vegetal,
indicando os seus principais constituintes.
Fonte: https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgC4ALe17kDMMR32dTw9z_54pjWBHi-Dq1mXV-WqgFc6pJjHHN4N2Q03zNIDRQbpTcENPYZNx6CpBLFxzJF7WX-kM9t64eA5Ue0BDY2U8kibp2XDKxQEsdVKCUbH8bYn1bzkh2MdnBXcD3X/s400/5.png
5- Por que podemos afirmar, com certeza,
que as antocianinas não participam da fotossíntese?
Porque as antocianinas são pigmentos acessórios somente absorvem luz, mas em comprimentos de onda diferentes
daqueles absorvidos pelas clorofilas (pigmento fotossintetizante) e, portanto,
são apenas receptores suplementares de luz.
6- Por que certos frutos ficam mais
vermelhos quando expostos à luz solar?
Pois em seu interior estão presentes
flavonóide que são pigmentos fotossintéticos, que ficam em estado de excitação
quando expostos na luz solar, deixando-os com um aspecto mais avermelhado.
7- Se você
fizesse um extrato de pétalas de uma flor vermelha, que tipo de pigmento seria
encontrado ao fazer sua separação por partição em solventes? O que aconteceria
se você alterasse o pH da solução?
Seriam encontrados flavonoides, como por
exemplo, as antocianinas. Quando há alteração no pH ocorre a mudança da coloração do extrato.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Roteiro adaptado de:
MAESTRI et al. Fisiologia Vegetal (exercícios práticos),
Viçosa. Editora UFV, 1998.
FREITAS, H.M.B. Manual de
Atividades Práticas de Fisiologia Vegetal, Salvador: Edufba, 2006.
